Ele define o separador dos diretórios de acordo com o sistema operacional.
Exemplo:
Window -> c:\pasta_projeto\videos
Linux -> /home/pasta_projeto/videos
Perceba que o Windows usa como separador a barra invertida '\', e o Linux a barra normal '/'
o os.sep
pega esse valor de forma automática de acordo com o sistema em que o script esteja sendo executado