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Ele define o separador dos diretórios de acordo com o sistema operacional.
Exemplo:
Window -> c:\pasta_projeto\videos
Linux -> /home/pasta_projeto/videos

Perceba que o Windows usa como separador a barra invertida '\', e o Linux a barra normal '/'

o os.sep pega esse valor de forma automática de acordo com o sistema em que o script esteja sendo executado

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